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Peps6捕獲BAC試劑盒
產(chǎn)品時(shí)間:2025-06-11
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Peps6捕獲BAC試劑盒

Peps6捕獲BAC試劑盒 

描述:

Peps6-CaptoBAC試劑盒在大多數(shù)樣本中進(jìn)行細(xì)菌捕獲。它包括涂有Peps6的磁珠和一種特別開(kāi)發(fā)的緩沖液,以確保優(yōu)良的細(xì)菌捕獲。 根據(jù)試劑盒說(shuō)明,將樣本稀釋在緩沖液中,然后加入磁珠。經(jīng)過(guò)短暫的振蕩孵育后,去除上清液,同時(shí)磁鐵(不提供)將磁珠固定在下方。然后細(xì)菌在磁珠上濃縮,并且沒(méi)有潛在的抑制劑。它們可以用常規(guī)檢測(cè)方法進(jìn)行分析。 該產(chǎn)品的保質(zhì)期為2年,保存在2-8°C。該產(chǎn)品有2550測(cè)試格式可供選擇。

 

參考編號(hào):MP10031-50T

  • 數(shù)量:50次測(cè)試

成分:

  • 1 mLPeps6磁珠(編號(hào):MP20006-1ML

  • 50毫升緩沖液TTGB 10X(編號(hào):TP10004-50ML

 

Peps6-捕獲BAC試劑盒

描述:

Peps6-CaptoBAC試劑盒在大多數(shù)樣本中進(jìn)行細(xì)菌捕獲。它包括涂有Peps6的磁珠和一種特別開(kāi)發(fā)的緩沖液,以確保優(yōu)良的細(xì)菌捕獲。 根據(jù)試劑盒說(shuō)明,將樣本稀釋在緩沖液中,然后加入磁珠。經(jīng)過(guò)短暫的振蕩孵育后,去除上清液,同時(shí)磁鐵(不提供)將磁珠固定在下方。然后細(xì)菌在磁珠上濃縮,并且沒(méi)有潛在的抑制劑。它們可以用常規(guī)檢測(cè)方法進(jìn)行分析。 該產(chǎn)品的保質(zhì)期為2年,保存溫度為2-8°C。該產(chǎn)品有2550測(cè)試格式可供選擇。

 

參考編號(hào):MP10031-25T

  • 數(shù)量:25次檢測(cè)

成分:

  • 0.5 mLPeps6磁珠(參考編號(hào):MP20006-0.5ML

  • 25 毫升緩沖液 TTGB 10X(參考編號(hào):TP10004-25ML

                                                

1. 簡(jiǎn)介

合成分子 Peps6 源自載脂蛋白 HApoH),保留了其結(jié)合微生物的能力,包括病毒(1-2)、真菌(3)和細(xì)菌(4-6)。ApoH 蛋白也稱為載脂蛋白 H  β2 - 糖蛋白 1,其多特異性允許對(duì)多種微生物進(jìn)行多重捕獲。這種親和捕獲方法簡(jiǎn)單、溫和且快速,可使微生物保持活力和感染性。捕獲的微生物被濃縮并與潛在抑制劑分離,從而更易通過(guò)常規(guī)特異性技術(shù)(如 PCRELISA 等)進(jìn)行鑒定 / 檢測(cè),顯著提升靈敏度(7-10)。
這些特性使 Peps6-CaptoBAC 試劑盒成為一種創(chuàng)新的樣品預(yù)處理工具,用于細(xì)菌分離,以便進(jìn)行高靈敏度的鑒定 / 檢測(cè)。

2. 123原理

 Peps6-CaptoBAC 試劑盒中,Peps6 與磁珠結(jié)合。試劑盒提供一種特殊結(jié)合緩沖液,可增強(qiáng) Peps6 對(duì)細(xì)菌的親和力。將 Peps6 磁珠加入任何復(fù)雜生物樣本中(用提供的緩沖液稀釋),樣本中的初始雜質(zhì)和潛在抑制劑可被去除,而通過(guò) Peps6 與磁珠結(jié)合的細(xì)菌則通過(guò)磁鐵保留在試管中。隨后,細(xì)菌可通過(guò)分子技術(shù)(PCR)、免疫檢測(cè)(ELISAWB)或在合適培養(yǎng)基中培養(yǎng)等方法進(jìn)行鑒定 / 檢測(cè)。

3. 45試劑

REF MP20006 – Peps6 磁珠
合成 Peps6 包被的磁珠懸浮液濃度為1013個(gè)珠子 / 毫升,珠子直徑約 200 nm,緩沖液含 < 0.02% 疊化鈉。
REF TP1006704 – TTGB 10X 
緩沖液
TTGB 10X 
緩沖液為淺黃色水性結(jié)合緩沖液,經(jīng) 0.2 µm 過(guò)濾,濃縮 10 倍,使用前需按說(shuō)明稀釋。
注意:試劑盒中89的所有試劑均可單獨(dú)購(gòu)買。

4. 10存儲(chǔ)

  • 所有試劑可在室溫下運(yùn)輸,功能不受影響;收到后需存儲(chǔ)于           2-8°C。

  • 所有試劑在 2-8°11C 下可穩(wěn)定保存至有效期。

  • Peps6 磁珠瓶需12直立存放,確保磁珠始終浸沒(méi)在存儲(chǔ)液中。

  • 使用后,所有試劑需13迅速放回 2-8°C 存儲(chǔ)。

5. 14所需材料(未提供)

  • 無(wú)菌蒸餾水。

  • 合適的微量移液器和無(wú)菌濾芯吸頭。

  • 合適的反應(yīng)管(玻璃或聚丙烯塑料材質(zhì),避免聚苯乙烯)。

  • 孵育過(guò)程中用于樣品15攪拌的設(shè)備。

  • 溫控培養(yǎng)箱。

  • 層流罩或目標(biāo)微生物所需的特定微生物環(huán)境。

  • 與試管兼容的側(cè)向磁16吸裝置(注意:不同市售磁鐵的吸引力和速度可能不同)。

  • 目標(biāo)微生物檢測(cè)所需17的材料和試劑。

6. 18安全注意事項(xiàng)

  • 為確保穩(wěn)定性,所有試劑需小心處理,避免污染。

  • 是否需要無(wú)菌操作區(qū)19域取決于捕獲微生物的用途(如需培養(yǎng)則必須無(wú)菌)。

  • Peps6 磁珠存儲(chǔ)20緩沖液含 < 0.02% 疊化鈉,痕量疊化鈉不影響捕獲或微生物活力,使用前無(wú)需清洗磁珠。疊化鈉可能與銅或鉛管道反應(yīng)生成爆炸性疊氮化物,通過(guò)管道處理時(shí)需用大量水沖洗,防止疊氮化物堆積。

  • 試劑和樣本需按照良21好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范處理,未使用的試劑、樣本和廢棄物需按當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置。

  • 請(qǐng)勿使用過(guò)期試劑。22

7. 23重要提示

本方案為最多 5 mL 樣本中細(xì)菌結(jié)合的通用指南,根據(jù)細(xì)菌菌株、樣本性質(zhì)和體積,可能需要進(jìn)一步優(yōu)化以實(shí)現(xiàn)優(yōu)良結(jié)合能力。
ApoH 
捕獲機(jī)制不同于24常規(guī)抗原 - 抗體相互作用,如需確保實(shí)驗(yàn)成功,請(qǐng)聯(lián)系我們的技術(shù)支持。
捕獲細(xì)菌前,Peps62526磁珠不得渦旋、冷凍、干燥、高溫(>60°C)或端 pH>9  < 5)處理。若需保留微生物活力,捕獲后也需遵循同樣注意事項(xiàng)。

 

  • 若懷疑微生物負(fù)載較27高,可增加磁珠體積。磁珠可結(jié)合大量微生物:1 µL 磁珠可從純培養(yǎng)物中結(jié)合1×107個(gè)大腸桿菌。

8. 28樣本采集與處理

現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明,Peps6 磁珠可捕獲各種固體(懸浮后)或液體樣本中的細(xì)菌。

 

  • 固體樣本(如肉類、29組織)需在 1X 捕獲緩沖液中研磨,過(guò)濾后再加入磁珠,否則磁珠可能被樣本顆??ㄗ。瑹o(wú)法磁化。

  • 優(yōu)先使用新鮮樣本,30避免混合樣本?;旌涎?、血清或血漿可能形成凝塊,捕獲并聚集磁珠,使其無(wú)法結(jié)合微生物。

  • 若進(jìn)行細(xì)菌添加實(shí)驗(yàn)31,需使用臨床菌株而非 “標(biāo)準(zhǔn)菌株"(如 ATCC 菌株),許多標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì) ApoH 蛋白或 Peps6 分子的親和力會(huì)下降。

  • 使用全血時(shí),需選擇32EDTA 抗凝劑。

  • 所有稀釋或處理后的33樣本需迅速與 Peps6 磁珠接觸。

  • 樣本體積可按比例調(diào)34整,若懷疑微生物滴度較低,可擴(kuò)大樣本體積。超過(guò) 5 mL 的樣本,需聯(lián)系技術(shù)支持。
              
    受損微生物可能失去對(duì) A35poH 蛋白或      Peps6 分子的親和力,因此:

  • 優(yōu)先使用新鮮樣本材料。

  • 檢查冷凍樣本中細(xì)菌36的活力,避免樣本反復(fù)凍融。

  • 使用劣質(zhì)樣本會(huì)導(dǎo)致37靈敏度下降。

9. 38使用說(shuō)明

樣本在捕獲緩沖液中的稀釋
將樣本稀釋于捕獲緩沖液中并渦旋,稀釋后緩沖液終濃度必須為 1X

 

  • 小體積樣本(1-199 µL:將 TTGB 10X 緩沖液用無(wú)菌蒸餾水稀釋至 1X,加入足夠的 1X TTGB 緩沖液,使樣本總體積達(dá)到 1      mL

  • 大體積樣本(039.2-5.0 mL:將 TTGB 10X 緩沖液用無(wú)菌蒸餾水稀釋至 2X,按 1:1 體積比加入樣本中。

 

捕獲步驟 40

  • 使用前,通過(guò)輕柔吹打或手動(dòng)倒置底重懸 Peps6 磁珠(切勿渦旋)。

  • 每個(gè)樣本加入 20 41µL      Peps6 磁珠。

  • 輕輕混勻(切勿渦旋42)。

  •  35-37°C 43適當(dāng)攪拌孵育 30 分鐘:試管需直立并劇烈攪拌,使磁珠保持懸浮狀態(tài)(如設(shè)置 Thermomixer  1000 rpm)。

  • 將反應(yīng)管置于磁鐵上44,直至所有磁珠側(cè)向沉淀且上清液澄清。

  • 棄去上清液,避免擾45動(dòng)磁珠沉淀,細(xì)菌即濃縮于沉淀中。

洗滌(可選)46
純培養(yǎng)物、血漿或血清無(wú)需洗滌,全血等復(fù)雜樣本可能需要洗滌:

  • 向磁鐵上的磁珠沉淀中輕輕加入 1 mL      PBS(不含Ca2+/Mg2+),勿重懸磁珠。

  • 棄去上清液,避免擾47動(dòng)沉淀。

  • 如需可重復(fù)洗滌一次48。

10.49 細(xì)菌檢測(cè)

結(jié)合的細(xì)菌可直接在 Peps6 磁珠上通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方案檢測(cè)(必要時(shí)可調(diào)整)。注意:小體積樣本需在加入重懸液前短暫離心磁珠沉淀。

 

  • 培養(yǎng):將磁50珠重懸于合適培養(yǎng)基中,直接涂布于培養(yǎng)皿,在細(xì)菌適宜溫度下孵育。

  • PCR:將51磁珠重懸于裂解緩沖液中,劇烈渦旋 15 秒以破壞沉淀。裂解后,通過(guò)磁鐵或離心(10,000 g,分鐘)去除磁珠,轉(zhuǎn)移上清液至新管,按常規(guī)流程提取 DNA 并進(jìn)行 PCR。

  • 顯微鏡觀察52:將磁珠重懸于 PBS 或特定培養(yǎng)基中,磁珠無(wú)自發(fā)熒光,可用于熒光檢測(cè)。

  • 其他方法53將磁珠重懸于適當(dāng)溶液中,如需其他特定應(yīng)用,請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持。

11.54 故障排除

以下為常見(jiàn)問(wèn)題指南,如需進(jìn)一步幫助或定制方案,請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持。
磁珠和緩沖液處理55

  • 需在無(wú)菌環(huán)境中打開(kāi) Peps6 磁珠瓶,污染會(huì)降低穩(wěn)定性和效率。

  • 必須將磁珠加入樣本56中,而非反向操作。

  • 使用無(wú)菌蒸餾水稀釋57緩沖液,確保混合后 TTGB 緩沖液為 1X 濃度。

  • 檢查 TTGB 緩沖液58是否污染。

  • 根據(jù)微生物或樣本類59型,可優(yōu)化捕獲緩沖液的選擇和用量。

 

大體積樣本 60

  • 5-100 mL 大體積樣本需額外購(gòu)買磁珠和緩沖液。

  • 樣本稀釋:直接加入612X  10X 濃縮的 TTGB 緩沖液,使終濃度為 1X。

  • 每個(gè)樣本加入 20 62µL 磁珠,超過(guò) 10 mL 的樣本可能需要增加磁珠體積。

  • 超過(guò) 20 mL 的樣63本可采用軌道攪拌(設(shè)置為 3 rpm)代替直立攪拌。

  • 大體積樣本需預(yù)溫至64室溫或孵育溫度后再加入磁珠。

 

孵育
-65 
嚴(yán)格遵循溫度和時(shí)間以確保優(yōu)良結(jié)果。

  • 選擇足夠大的試管以66保證充分?jǐn)嚢瑁ㄈ?span> 1 mL 反應(yīng)用 1.5 mL 試管)。

  • 試管需直立并劇烈攪67拌(如 1000 rpm),使用玻璃或聚丙烯試管,避免聚苯乙烯。

 

磁化
-6869 
若上清液中殘留磁珠或沉淀被吸頭擾動(dòng),需延長(zhǎng)磁化時(shí)間(細(xì)胞培養(yǎng)樣本通常 2 分鐘,全血樣本可達(dá) 15 分鐘)。

  • 使用高能釹磁鐵(870-12 kg 吸引力)確保磁珠全磁化,磁力過(guò)低會(huì)導(dǎo)致磁珠和微生物損失,過(guò)強(qiáng)可能使磁珠嵌入塑料管。

  • 吸棄上清液前需去除71氣泡。

  • 磁化時(shí)間不得超過(guò) 3720 分鐘,以免破壞微生物完整性。

 

洗滌
-73 
細(xì)胞上清液、血漿或血清無(wú)需洗滌(除非檢測(cè)系統(tǒng)高度敏感),全血等復(fù)雜樣本可能需要洗滌 2 次,洗滌時(shí)需在磁鐵上操作,切勿渦旋。

 

  • PBS 可替換為其他74洗滌緩沖液,需聯(lián)系技術(shù)支持確認(rèn)兼容性。

 

檢測(cè)
-75 
部分細(xì)菌捕獲后無(wú)法培養(yǎng)(處于活但不可培養(yǎng)狀態(tài)),需通過(guò)顯微鏡或 PCR 驗(yàn)證捕獲效果。

  • 裂解步驟至關(guān)重要,76裂解緩沖液效率取決于化學(xué)組成,建議添加裂解對(duì)照,可劇烈渦旋磁珠以確保裂解充分。

  • 如需光密度測(cè)量,需77用磁鐵去除磁珠,僅檢測(cè)上清液(磁珠呈深棕色,會(huì)嚴(yán)重干擾光學(xué)測(cè)量)。

 

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